细胞培养基(pc3细胞用什么培养基)
发布时间:2020/12/26 07:56:46 点击:3

你知道各种细胞培养基的区别吗?

现代细胞培养已经有固定的培养基配方,如DMEM和RPMI1640。大部分属于古典文化媒介。他们是怎么发展起来的?

很多人在实验中只养一两种细胞,也许只遇到一两种培养基。然而历史上积累的经典媒体至少有十几家。回顾这些培养基,我们可能会看到前人为发展细胞培养所做的一些努力。

图。细胞培养的三位创始人:(左)哈里伊格尔,(中)雷纳托杜尔贝科,(右)西奥多帕克

最早的经典培养基是BME,由美国生理学家哈里伊格尔(1905-1992)于1955年开发,用于培养HeLa细胞和小鼠成纤维细胞。他发现了体外细胞生长所需的最低营养,这就是BME公式。它由氨基酸、维生素、无机盐、D-葡萄糖和酚红组成。维生素9种,氨基酸13种,其中必需氨基酸10种,半胱氨酸、酪氨酸、谷氨酰胺。

在BME之后,出现了一种改进型——MEM。

MEM可用于同时附着和悬浮细胞,并可培养HeLa、BHK-21、293、MCF-7等细胞。它是由哈里伊格尔根据BME公式开发的。之后,MEM培养基的改良配方,如GMEM、MEM和DMEM等诞生了。

图。(左)正常细胞。(右)转化细胞

DMEM是意大利生理学家杜尔贝科改进的恩格尔培养基。DMEM是最常用的,可以支持许多贴壁细胞的生长,包括原代成纤维细胞、神经元、人脐静脉内皮细胞、平滑肌细胞和一些细胞系如Hela(常用于癌症和信号转导研究)、293(常用于外源蛋白表达)、Cos-7(常用于转染研究)等。

DMEM的维生素含量大约是MEM的四倍,氨基酸含量大约是MEM的一倍,而且还有三种以上的氨基酸,所以可以说它更有营养。

GMEM的氨基酸和维生素浓度是BME的两倍。原来是MEM加10%磷酸胰蛋白酶?用于培养BHK-21细胞和研究影响细胞增殖的遗传因素。

图。显微镜下免疫荧光染色后的细胞

A-MEM也是MEM的改良版,包括非必需氨基酸、丙酮酸钠、硫辛酸、维生素B12、生物素和抗坏血酸,可以培养角质形成细胞和原代大鼠星形胶质细胞。

汉姆F-12培养基是由汉姆于1965年左右引进的用于CHO细胞的无血清培养(CHO细胞是由美国遗传学家西奥多T帕克于1957年从一只成年雌性仓鼠的卵巢中分离出来的,并广泛用于生物工程)。与其他基础培养基相比,F-12含有多种成分,包括锌、腐胺、次黄嘌呤和胸苷。也可用于培养软骨细胞和前列腺上皮细胞。

M199最初用于鸡胚成纤维细胞的营养研究。它具有广泛的物种适用性,特别是用于培养未转化的细胞。M199广泛用于病毒学和疫苗生产。与其他基础培养基相比,培养基199含有独特的成分,包括腺嘌呤、腺苷、次黄嘌呤、胸腺嘧啶和其他维生素。

RPMI 1640主要用于培养悬浮细胞。它含有还原剂谷胱甘肽和高浓度维生素(如肌醇和胆碱),还含有生物素、维生素B12和其他MEM和DMEM不含的成分。

需要指出的是,经典培养基不含蛋白质、脂类和生长因子,需要与胎牛血清一起使用。

推荐的参考材料

约瑟夫g加尔,j理查德麦金托什。细胞生物学里程碑式的论文:篇庆祝美国细胞生物学协会成立40周年的精选研究文章。冷泉港实验室出版社(2000年12月)

哺乳动物细胞在化学合成培养基中的克隆生长。纳特。阿卡德。Sci。美国1965,53:288-293。

安顺市西秀区人民政府办公室

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